Pregunta
de un lector acerca del modo de aislar células madre en el laboratorio.
"Cuando
se extaen células madre de la médula ósea, o de cualquier otro tipo de
fuente (grasa, cordón umbilical, etc), ¿en qué características físicas
o químicas diferenciales del resto de células se basan las técnicas
para su separación? ¿Son siempre las mismas en cualquiera de las
fuentes?"
En general, los métodos de obtención de células madre somáticas se
basan en la expresión de determinadas
moléculas en la membrana,
lo que permite su identificación y purificación. Dado que estas
moléculas pueden ser reconocidas por
anticuerpos específicos,
el uso de baterías de anticuerpos asigna un
"inmunofenotipo" a
cada subpoblación celular. Lógicamente, este inmunofenotipo es distinto
en células madre procedentes de distintos tejidos.
Por ejemplo, un inmunofenotipo característico de las células madre
hematopoyéticas de la médula ósea es el denominado
"CD133+, CD117+ (c-kit), CD34+, CD38-, Lin-".
Esto significa que estas células pueden distinguirse por
poseer
en su membrana los antígenos CD133, CD117 y CD34 (los que llevan el
superíndice "+"), y
porque no expresan el antígeno de membrana CD38 ni marcadores de linaje
celular (los que llevan el
superíndice
"-").
Con
esta información, se procede a "marcar" células de médula ósea con
anticuerpos específicos para estos estos marcadores e introducirlas
después en un
citómetro
de flujo,
que mostrará las distintas subpoblaciones celulares en función de su
tamaño y de la presencia o no de estos antígenos. Otras técnicas se
basan en hacer "cell sorting" (es decir, separar las
subpoblaciones celulares), utilizando estas características. Otra
tecnología para hacer lo mismo es la utilización de
bolitas magnéticas
que tienen en su superficie anticuerpos específicos frente a los
antígenos de membrana: las células que expresan dicho antígeno quedan
pegadas a las bolitas, que se separan después gracias a la aplicación
de un campo magnético; está técnica permite obtener grandes cantidades
de las células que queremos aislar, con un buen grado de pureza.
Un lector
nos pregunta, acerca de la interferencia de ARN
:
"¿Los
genes que fabrican ARN de interferencia en organismos superiores, como
en los humanos, son genes cuya secuencia debiera ser
palindrómica
para que el ARNm producido se pliegue sobre sí mismo y formar doble
cadena, o simplemente sus ARNm deben contener una o varias secuencias
complementarias del ARNm del gen que pretenden silenciar? ¿o ambos?
Efectivamente, los ARN interferentes codificados en el
genoma (llamados microARN, o
miARN)
tienen una secuencia palindrómica, es decir dos pequeñas
repeticiones invertidas
separadas por unos pocos nucleótidos. Así al transcribirse, el ARN
mensajero que se forma se pliega en forma de
horquilla,
debido a la complementariedad de bases entre las repeticiones
palindrómicas. Esta horquilla es procesada por la maquinaria que se
muestra en
este video,
y finalmente da lugar a los ARN interferentes pequeños maduros. Además,
obviamente, la secuencia de una de las dos hecbras del miARN debe ser
complementaria a la del ARN mensajero que van a silenciar, para poder
unirse a él y degradarlo.
